體外染色體畸變?cè)囼?yàn)的目的是檢測(cè)培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體結(jié)構(gòu)畸變。結(jié)構(gòu)畸變可份為染色體型和染色單體型。大多數(shù)化學(xué)致突變物誘導(dǎo)染色單體型突變，但染色體型突都也可發(fā)生。多倍體增加表明受試物可導(dǎo)致染色體數(shù)目畸變。但是，本方法不用于檢測(cè)數(shù)目畸變。染色體突變和相關(guān)事件可以引起很多人類遺傳性疾病，并且有證據(jù)表明，引起體胡魔癌基因和抑癌基因改變的染色體突變以及相關(guān)事件，與人類和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的腫瘤發(fā)生有關(guān)。體外柴色體畸變?cè)囼?yàn)可應(yīng)用于已建立的細(xì)胞系、細(xì)胞株或原代細(xì)胞培養(yǎng)，根據(jù)培養(yǎng)生長(zhǎng)能力、核型的穩(wěn)定性、染色體數(shù)目、染色體差異以及染色體響變的自發(fā)頻率選擇合適的細(xì)胞。
體外染色體畸變?cè)噭┖?IPHASE in vitro mammalian chromosome aberration test kit (CHL)
北京匯智泰康醫(yī)藥技術(shù)有限公司針對(duì)染色體畸變?cè)囼?yàn)開(kāi)發(fā)染色體畸變?cè)囼?yàn)試劑盒， 本試劑盒省去了陽(yáng)性底物成分準(zhǔn)備、誘導(dǎo) S9 制備，可以直接使用，大大縮短了實(shí)驗(yàn)周期；試劑盒各成分均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量檢測(cè)，無(wú)雜菌污染，誘導(dǎo) S9 活性均符合染色體畸變?cè)囼?yàn)要求，實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠、重現(xiàn)性高。應(yīng)用廣泛，可進(jìn)行食品、化學(xué)品、農(nóng)藥、消毒劑、食品添加劑、藥物殘留、化妝品、容器與包裝材料等多個(gè)方面的遺傳毒理學(xué)檢測(cè)。
一、體外染色體畸變?cè)噭┖惺褂谜f(shuō)明書
【試驗(yàn)原理】
在加入和不加入代謝活化系統(tǒng)的條件下，使培養(yǎng)的哺乳類動(dòng)物細(xì)胞暴露于受試物中，用中期分裂相阻斷劑秋水仙素進(jìn)行處理，使細(xì)胞停止在中期分裂相，隨后收獲細(xì)胞、制片、染色并分析受試物是否誘發(fā)體外培養(yǎng)的哺乳類細(xì)胞染色體畸變，從而評(píng)價(jià)受試物致突變的可能性。
【產(chǎn)品組成】
【產(chǎn)品使用說(shuō)明】
1、細(xì)胞復(fù)蘇
從-70冰箱取出細(xì)胞，于37℃水浴融化，1000rpm離心5min，棄上清，用含10%牛血清RPMI 1640培養(yǎng)液（RPMI-10）中重懸細(xì)胞；1000rpm再次離心5min，棄上清，用RPMI-10重懸后接種于細(xì)胞瓶中培養(yǎng)。
2、細(xì)胞準(zhǔn)備
將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，貼壁生長(zhǎng)良好的CHL細(xì)胞用0.25 %（ Trypsin-EDTA）消化處理制成細(xì)胞懸液，5 mL/瓶接種于25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，于37℃、5%二氧化碳培養(yǎng)箱中加濕培養(yǎng)約24 h-48h。
3、染毒處理
吸去培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液，加入一定濃度的受試物、S9混合液（不加S9混合液時(shí)，需用培養(yǎng)液補(bǔ)足）以及一定量不含血清的培養(yǎng)液，于培養(yǎng)箱中處理6h。在收獲細(xì)胞前4 h加入細(xì)胞分裂中期阻斷劑秋水仙素溶液（終濃度為0.2 mg/mL）。具體試驗(yàn)方案見(jiàn)下表：
(1)S9混合液配制
(2)推薦染毒培養(yǎng)體系配制方案（以3個(gè)受試物劑量組為例）
注：24小時(shí)染毒所用陽(yáng)性底物需稀釋2倍后加入0.05 mL
4、收獲細(xì)胞及制片
用0.25%的溶液消化細(xì)胞，加入0.075mol/路化甲溶液進(jìn)行低滲處理，固定液（甲醇：斌戳酸=3：1）進(jìn)行固定并滴片，用吉姆薩染液染色，中性樹(shù)膠封片，并于油鏡下進(jìn)行閱片，記錄畸變細(xì)胞的坐標(biāo)位置及畸變類型，具體操作方法參照國(guó)標(biāo)方法進(jìn)行。
5、畸變類型分析及結(jié)果判定
結(jié)果分析及判定可參照：473 體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)，《化學(xué)品測(cè)試方法·健康效應(yīng)卷》（第二版），2013年，(ISBN：978-7-5111-1476-1)。
【注意事項(xiàng)】
1、實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)自行準(zhǔn)備RPMI 1640培養(yǎng)液、牛血清、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、24孔細(xì)胞培養(yǎng)板、滅菌槍頭、無(wú)菌移液管、二氧化碳培養(yǎng)箱、振蕩器、15、50mL離心管等，所有耗材需做無(wú)菌處理。
2、實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在符合細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)要求的環(huán)境下進(jìn)行。
匯智泰康是一家位于中美兩地的生物醫(yī)藥合同研發(fā)機(jī)構(gòu)，整合中美兩地的藥物研發(fā)技術(shù)服務(wù)平臺(tái)，基于AAALAC、GLP、ISO/IEC 17025實(shí)驗(yàn)室認(rèn)證，面向很多企業(yè)及研發(fā)機(jī)構(gòu)提供分析化學(xué)、DMPK、藥理藥效、生物學(xué)、以及毒理安全性評(píng)價(jià)產(chǎn)品與服務(wù)。
3、主要產(chǎn)品：
（1）體外藥物代謝產(chǎn)品
- Ⅰ相代謝穩(wěn)定性試劑盒
- Ⅱ相代謝穩(wěn)定性試劑盒
- CYP450酶代謝表型研究試劑盒
- 不同種屬肝微粒體，肝S9
- 重組酶，標(biāo)準(zhǔn)品，孵育系統(tǒng)等
（2）遺傳毒性產(chǎn)品
- Ames試劑盒
- 體外染色體畸變?cè)囼?yàn)試劑盒
- TK基因突變?cè)囼?yàn)試劑盒
- HPGRT基因突變?cè)噭┖?/span>
- 彗星試驗(yàn)試劑盒
- 誘導(dǎo)大鼠肝S9等
（3）空白生物基質(zhì)
- 空白血清：食蟹猴，恒河猴，比格犬，大鼠，小鼠，豬，兔
- 空白血漿：食蟹猴，恒河猴，比格犬，大鼠，小鼠，豬，兔
- 空白血：食蟹猴，恒河猴，比格犬，大鼠，小鼠，豬，兔
- 空白尿液：食蟹猴，恒河猴，比格犬，大鼠，小鼠
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